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锐谈「 Biotechnol Bioeng：运用无细胞卵白合成与分离式GFP相结合的策略可表达并定量数十种候选酶

分类：新闻动态
作者：木冰衿
来源：
发布时间：2023-04-18 15:38
访问量：

锐谈「 Biotechnol Bioeng：运用无细胞卵白合成与分离式GFP相结合的策略可表达并定量数十种候选酶

【概要描述】

分类：新闻动态
作者：木冰衿
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发布时间：2023-04-18 15:38
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不日，华南理工大学与清华大学于「Biotechnology & Bioengineering」合作发表题为“Rapid prototyping enzyme homologs to improve titer of nicotinamide mononucleotide using a strategy combining cell‐free protein synthesis with split GFP”的查究论文。

该研究将荧光蛋白GFP分成两个部分， GFP1-10和GFP11。两个部分不会单独发出荧光，但它们可以自发地相互作用形成有荧光的GFP。将GFP11部分的16个氨基酸融合到目标蛋白基因的末端，并通过无细胞蛋白合成技术表达后，再加入单独表达纯化的GFP1-10即可实现荧光定量，从而精确定量目标蛋白浓度。该研究耗时仅16小时，不仅省却了传统蛋白表达的培养、诱导、收集、破碎等冗杂步骤，更有效解决了粗酶定量的难题。

该考究为同功能酶的筛选供给了一种简便的想法，适合于对数十种同功能酶进行定量筛选，以寻觅具有较高催化活性的候选酶。此外，若该考究与高通量主动化平台相结合，可进一步提高同功能酶筛选效率。