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锐谈「 ACS OMEGA：CRISPR-Cas12a 技术在 Amycolatopsis sp 高产天然香兰醛的研究

分类：新闻动态
作者：
来源：
发布时间：2023-04-26 10:39
访问量：

锐谈「 ACS OMEGA：CRISPR-Cas12a 技术在 Amycolatopsis sp 高产天然香兰醛的研究

【概要描述】

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发布时间：2023-04-26 10:39
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香草醛被称为“香料皇后”，在食品、饮料、香料和医药等领域中都有着广泛的应用。

Amycolatopsis sp，DNA中鸟嘌呤-胞嘧啶「GC」含量高「>70%」，DNA转化和同源重组效率较低。拟无枝酸菌没有一套老练的遗传操作工具，导致其关系的遗传操作查究进展十分。作者胜利开辟了一种多功能CRISPR-Cas12a用于Amycolatopsis sp. CCTCC NO: M2011265进行高效、无标记和无疤痕的基因组编纂，敲除香草醛生物合成门路中编码副产品酶的两个基因，获得了一个突变体ΔvdhΔphdB。

首先CRISPR-Cas12a介导的获得Amycolatopsis sp. Δvdh菌株，vdh基因缺失显著补充了香草醛积累从7.22 g/L补充到9.11 g/L「补充26.2%」，显著降低了香兰酸积累，从2.07 g/L淘汰到0.48 g/L。

随后获得Amycolatopsis sp.ΔvdhΔphdB菌株，摇瓶发酵香草醛累积9.88g/L，香兰酸0.31 g/L。

结尾在3L发酵罐香草醛产量从10.60 g/L「野生型」补充到20.44 g/L，副产品香草酸从2.45 g/L减少到0.15 g/L，显著提高了香草醛产量，减少了副产品的形成;该突变体具有很大的资产应用潜力。