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锐谈 「 ACS SYNTH BIOL:生物传感器酶工程技术在阿洛酮糖生物合成的应用

锐谈 「 ACS SYNTH BIOL:生物传感器酶工程技术在阿洛酮糖生物合成的应用

  • 分类: 新闻动态
  • 作者:Z
  • 来源:
  • 发布时间:2023-09-18 16:16
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锐谈 「 ACS SYNTH BIOL:生物传感器酶工程技术在阿洛酮糖生物合成的应用

【概要描述】

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D-阿洛酮糖,一种具有多种生理功能的稀有糖,已被允许作为食品添加剂使用。

来自巴黎萨克雷大学的Ioana Grigoras团队在Synthetic Biology上发表了名为“Biosensor-based enzyme engineering approach applied to psicose biosynthesis”的文章。该文章开垦了一种基于生物传感器的酶筛选想法。

D-阿洛酮糖生物合成主要选择D-塔格糖-3-异构酶和D-阿洛酮糖-3-异构酶。此刻报道了许多出处的DPEase和DTEase,如慈鲷假单胞菌、根癌农杆菌和纤维素融化梭状芽胞杆菌。

这些酶可能成为工业生物催化的良好候选酶,出格是纤维素梭菌的DPEase的热稳定性,但它们展现出较低的酶活性,导致此刻所有工业应用腾贵。

作者选用根瘤菌中的转录因子PsiR。这是一个预测的LacI家族转录因子,证明PsiR不妨结合开动子区域的序列,并在别国D-阿洛酮糖的处境下制止受调控开动子的转录。PsiR固然存在于分歧的根瘤菌种中。

作者以mCherry为报告基因,未来自区别菌种的PsiR及开动子组合成七种区别的D-阿洛酮糖生物传感器。然后,作者对每个生物传感器进行了荧光强度试验,包含荧光的本原表达和反响鸿沟,以评估哪一种更适合筛选DPEase。终极选定来自A. tumefaciens中的转录因子的生物传感器。

作者使用随机诱变和荧光激活细胞分选,筛选了显示高水平汇报基因产量的DPEase突变体,证明了该生物传感器框架的有效性。

原文链接:https://academic.oup.com/synbio/article/4/1/ysz028/5650417?login=false

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